Метод определения истинной или ложной двойной устойчивости

Различная степень инактивации препаратов ГИНК создает в организме отдельных больных неодинаковую концентрацию активно действующего препарата. Поэтому критерии устойчивости микобактерии туберкулеза к этим препаратам не являются едиными для всех больных. Исходя из этого целесообразно параллельно с определением лекарственной устойчивости использовать предложенную Н. М. Рудым (1962, 1964) туберкулостатическую пробу. Сущность пробы заключается в определении чувствительности (или устойчивости) микобактерии туберкулеза, выделяемых больным, к тем концентрациям тубазида, которые создаются в крови больного после приема препарата. Проба Н. М. Рудого позволяет одновременно учитывать и чувствительность микобактерии туберкулеза больного, и степень инактивации (концентрации) тубазида. После приема больным препарата в его крови создаются бактериостатические активные концентрации и кровь, разведенная в 2, 4, 8 раз, задерживает рост культуры микобактерии туберкулеза, выделенной от больного, у которого определяется туберкулостатическая проба. За 2-3 дня до определения туберкулостатической пробы больному отменяют все противотуберкулезные лечебные средства, кроме препарата ГИНК, используемого для лечения. В день исследования больной получает разовую дозу препарата (т. е. количество препарата, обычно получаемое им на прием). Через 3 часа после приема препарата (если больной одноразово получает суточную дозу тубазида, то через 6 часов) берут из вены 6 мл крови, которую из шприца выливают в центрифужную пробирку, содержащую 0,6 мл 6% раствора лимоннокислого натрия и центрифугируют. Затем плазму отсасывают и готовят ее разведения по следующей схеме. В итоге в опыте имеется 4 пробирки с 1-м, 2-м и 3-м разведением плазмы больного и контрольная. В каждую пробирку засевают по 0,2 мл суспензии культуры микобактерии туберкулеза, выделенной от данного больного. Суспензию культуры готовят так же, как для определения лекарственной устойчивости по стандарту мутности 500 млн. микробных тел, но без последующего разведения.