Протеинограмма

Различные белки в одной и той же среде имеют разные электрокинетические потенциалы, поэтому скорость движения их в электрическом поле будет различна. На этом явлении основано разделение белковых фракций методом электрофореза. Принцип электрофореза на фильтровальной бумаге заключается в том, что электрофоретическая миграция происходит на полосках фильтровальной бумаги, смоченных буферным раствором и помещенных между двумя электродами; при этом фильтровальная бумага рассматривается как индифферентное тело, содержащее буферный раствор. На середину бумажной полоски наносят каплю исследуемой сыворотки (0,005-0,01 мл). Электрофорез проводят в буферном растворе, имеющем ионную силу 0,1 и рН 8,6. Используют постоянный электрический ток напряжением от 120 до 300 вольт в зависимости от продолжительности электрофореза (4-18 часов). После окончания электрофореза электрофорегаммы в течение 15 минут высушивают в сушильном шкафу, где происходит фиксация белков благодаря коагуляции, и окрашивают специальными красителями (бромфенол синий, амидошварц и др.). На окрашенной электрофореграмме отчетливо видны пятна, соответствующие расположению отдельных белковых фракций. Окрашенную электрофореграмму колориметрпруют, причем количество краски, связанной с белком, является индексом, по которому судят о количестве белка в каждой части электрофореграммы.